Elektroforeza je laboratorijska tehnika koja se izvodi s ciljem razdvajanja molekula prema njihovoj veličini i električnom naboju, tako da se može postaviti dijagnoza bolesti, provjeriti ekspresija proteina ili identificirati mikroorganizmi.
Elektroforeza je jednostavan i jeftin postupak koji se koristi u laboratorijskim rutinama i u istraživačkim projektima. Prema namjeni elektroforeze, možda će biti potrebno provesti druge testove i preglede kako bi se, primjerice, došlo do dijagnoze.
Čemu služi
Elektroforeza se može izvoditi u više svrha, kako u istraživačkim projektima, tako i u dijagnostici, jer je to jednostavna i jeftina tehnika. Dakle, elektroforeza se može izvesti na:
- Identificirajte viruse, gljivice, bakterije i parazite, s tim da je ova primjena češća u istraživačkim projektima;
- Test očinstva;
- Provjerite ekspresiju proteina;
- Identificirati mutacije, na primjer korisne u dijagnozi leukemija;
- Analizirati vrste cirkulirajućeg hemoglobina koji su korisni u dijagnozi anemije srpastih stanica;
- Procijenite količinu proteina prisutnih u krvi.
U skladu sa svrhom elektroforeze, možda će biti potrebno provesti druge komplementarne testove kako bi liječnik dovršio dijagnozu.
Kako se to radi
Za elektroforezu potreban je gel, koji može biti poliakrilamid ili agaroza, ovisno o cilju, pufer za elektroforezu i kaca, marker molekularne težine i fluorescentna boja, uz UV ili LED svjetlosnu opremu, poznatu i kao transilluminator.
Nakon pripreme gela, mora se postaviti određeni predmet za izradu jamica u gelu, popularno zvanom češalj, i pustiti da gel stegne. Kad je gel spreman, samo nanesite tvari u jažice. Zbog toga se u jednu jažicu mora staviti marker molekularne težine, pozitivna kontrola, odnosno supstanca za koju se zna što je, negativna kontrola koja jamči valjanost reakcije i uzorci koji se analiziraju. Svi uzorci moraju se pomiješati s fluorescentnom bojom, jer je na taj način moguće vizualizirati trake na transilluminatoru.
Gel s uzorcima mora se staviti u posudu za elektroforezu koja sadrži specifičnu pufersku otopinu, a zatim se uređaj uključi tako da postoji električna struja i posljedično tome razlika potencijala, što je važno za odvajanje čestica prema njihovom opterećenju i veličini. Vrijeme elektroforetskog rada varira ovisno o svrsi postupka i može trajati do 1 sata.
Nakon određenog vremena moguće je vidjeti rezultat elektroforetskog prolaska kroz transilluminator. Kada se gel stavi pod UV ili LED svjetlost, moguće je vizualizirati uzorak traka: što je veća molekula, to manje migrira, približavajući se zdenac, dok je molekula lakša, veći je migracijski potencijal.
Da bi se reakcija potvrdila, potrebno je vizualizirati vrpce pozitivne kontrole i u negativnoj kontroli ništa, inače je indikativno da je došlo do onečišćenja i cijeli postupak se mora ponoviti.
Vrste elektroforeze
Elektroforeza se može izvoditi u različite svrhe, a prema svojoj namjeni može se koristiti nekoliko vrsta gela, a najčešći su poliakrilamid i agaroza.
Elektroforeza za identificiranje mikroorganizama češće se izvodi u istraživačkim laboratorijima, međutim, u dijagnostičke svrhe elektroforeza se može koristiti za identificiranje hematoloških bolesti i bolesti koje evoluiraju s povećanjem količine bjelančevina, što je glavna vrsta elektroforeze:
1. Elektroforeza hemoglobina
Elektroforeza hemoglobina laboratorijska je tehnika koja se izvodi radi identificiranja različitih vrsta hemoglobina koji cirkuliraju u krvi, što omogućava identificiranje prisutnosti bolesti povezanih sa sintezom hemoglobina. Vrsta hemoglobina identificira se elektroforezom pri određenom pH, idealno između 8,0 i 9,0, s verificiranim uzorkom vrpci koji se može usporediti s normalnim uzorkom, što omogućuje identificiranje prisutnosti abnormalnih hemoglobina.
Zbog čega se radi: Elektroforeza hemoglobina radi se na istraživanju i dijagnosticiranju bolesti povezanih sa sintezom hemoglobina, poput anemije srpastih stanica i bolesti hemoglobina C, osim što je korisna u razlikovanju talasemije. Saznajte kako protumačiti elektroforezu hemoglobina.
2. Elektroforeza proteina
Elektroforeza proteina ispit je koji liječnik zahtijeva kako bi procijenio količinu proteina koji cirkuliraju u krvi i, na taj način, utvrdio bolesti. Ovaj se test radi na uzorku krvi koji se centrifugira kako bi se dobila plazma, dio krvi koji, između ostalih tvari, čine proteini.
Nakon elektroforeze može se vizualizirati uzorak vrpci, a nakon toga i grafikon u kojem je naznačena količina svake frakcije proteina, što je osnovno za dijagnozu.
Za što se radi: Elektroforeza proteina omogućuje liječniku da istraži pojavu multiplog mijeloma, dehidracije, ciroze, upale, bolesti jetre, pankreatitisa, lupusa i hipertenzije prema uzorku traka i grafikonu predstavljenom u izvješću o pregledu.
Shvatite kako se to radi i kako razumjeti rezultat proteinske elektroforeze.
Jesu li ove informacije bile korisne?
da ne
Vaše mišljenje je važno! Ovdje napišite kako možemo poboljšati svoj tekst:
Ima li pitanja? Kliknite ovdje da biste dobili odgovor.
E-pošta na koju želite primiti odgovor:
Provjerite e-poruku s potvrdom koju smo vam poslali.
Tvoje ime:
Razlog posjeta:
--- Odaberite svoj razlog --- BolestŽive boljePomozite drugoj osobi Steknite znanje
Jeste li zdravstveni djelatnik?
NeFizicarFarmaceutska sestraNutricionistBiomedicinskiFizioterapeutBeauticianOstalo
Bibliografija
- BIOSFERA ENCIKLOPEDIJE, POZNAJUĆI ZNANSTVENI CENTAR. Elektroforeza: pojmovi i primjena. 2015. Dostupno na :. Pristupljeno 24. rujna 2019
- KASVI. Što je elektroforeza i zašto je važna?. Dostupno u:. Pristupljeno 24. rujna 2019
.png)
